新冠病毒核酸检测原理

核酸检测其实是检测受测者体内是否有新冠病毒的核酸（RNA）。每种病毒的核酸内部都含有核糖核苷酸，不同的病毒所含的核糖核苷酸数量和排列顺序不同，使得每种病毒都具有特异性。新冠病毒的核酸也是独特的，核酸检测就是对新冠病毒的核酸进行特异性检测。

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新冠病毒核酸检测一般流程

1.由医护人员穿戴防护服，收集位于病人鼻咽部的液体。

2.在实验室内对可能存在的病毒样液进行灭活处理，并提取样本的核酸（这里面病毒只占很小一部分）。

3.对该样本核酸进行PCR技术扩增。

4.将可与病毒信息匹配的荧光染料或荧光探针放入其中。

5.通过荧光强度，再结合对照组情况，综合判断是否存在新冠病毒。

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前提：确定新冠病毒特异性特征

专业人员将该病毒提取出来后对病毒RNA进行测序，在该病毒身上寻找可以用来鉴别其特异性的片段。

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准备工作：采集受测者样本

在进行核酸检测之前，需要采集受测者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等样本，对这些样本进行检测，就可以发现受测者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸检测常用的是咽拭子样本检测，将样本裂解提纯，从中提取出可能存在的新冠病毒核酸，检测的准备工作就做好了。

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关键技术：荧光定量RT-PCR

新冠病毒直径只有60-140纳米，一般细胞的直径在10-20微米，而头发丝的直径在60-90微米。如果将细胞比作可以容纳万人的足球场，而病毒则好比里面的某个小座位一般不起眼。要想在如此小的尺度上分离出病毒，首先就是非常困难的事情，更别提如何去识别新冠病毒与其他病毒的差别。目前人们所使用的新冠病毒核酸检测技术，主要是一种叫做实时荧光 RT-PCR 的技术。

PCR技术：聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DN**段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。同理，痕量的病毒感染，其核酸也可以被捕捉到。该技术由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。

实时荧光定量PCR技术：实时荧光定量PCR技术是PCR技术的拓展，所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

荧光定量RT-PCR技术是荧光定量PCR技术与RT-PCR技术的结合。

在检测过程中，先采用RT-PCR技术将新冠病毒的核酸（RNA）逆转录为对应的脱氧核糖核酸（DNA）；再采用荧光定量PCR技术，将得到的DNA进行大量复制，同时，使用特异性探针对复制得到的DNA进行检测，打上标记。如果存在新冠病毒核酸，仪器就可以检测到荧光信号，而且，随着DNA的不断复制，荧光信号不断增强，这样就间接检测到了新冠病毒的存在。